小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com课时分层作业(十三)(建议用时:40分钟)题组一目的基因的筛选与获取1.DNA的复制需要引物,主要原因是()A.可加快DNA的复制速度B.引物可与DNA母链通过碱基互补配对结合C.引物的5′端有助于DNA聚合酶的延伸DNA链D.DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链D[DNA聚合酶不能从5′端开始合成DNA,而只能从3′端延伸DNA链,因此,DNA复制需要引物。当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链,DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。]2.利用PCR技术从某种生物的基因组DNA中获取目的基因的前提是()A.有目的基因的DNA片段,作为模板进行复制B.有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物C.有足够的脱氧核苷酸作为原料D.加入足够数量的DNA连接酶进行指数式扩增B[利用PCR技术从某种生物的基因组DNA中获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成引物。]3.金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下,请回答下列问题:(1)从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA,通过________获得________用于PCR扩增。(2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2),为方便小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com构建重组质粒,在引物中需要增加适当的___________位点。设计引物时需要避免引物之间形成________________,而造成引物自连。(3)图中步骤1代表________,步骤2代表退火,步骤3代表延伸,这三个步骤组成一轮循环。(4)如果PCR反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有________(填序号:①升高退火温度②降低退火温度③重新设计引物)。[解析](1)目的基因的获取:从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA,通过逆转录获得cDNA用于PCR扩增。(2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2),为方便基因与载体相连构建重组质粒,在引物中需要增加适当的限制性内切核酸酶的切割位点。为了避免引物自连,设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对。(3)根据PCR的过程可知,图中步骤1为变性,步骤2为退火,步骤3为延伸,这三个步骤组成一轮循环。(4)如果PCR反应得不到任何扩增产物,可能的原因是退火温度过高,或者设计的引物不合适,不能与模板碱基配对。因此可采取的改进措施有降低退火温度、重新设计引物等。[答案](1)逆转录cDNA(2)限制性内切核酸酶碱基互补配对(3)变性(4)②③题组二基因表达载体的构建4.在基因工程的操作过程中,获得重组质粒不需要()①DNA连接酶②限制性内切核酸酶③RNA聚合酶④具有标记基因的质粒⑤目的基因⑥四种脱氧核苷酸A.③⑥B.②④C.①⑤D.①②④A[构建重组质粒时,首先要用限制酶切割含有目的基因的DNA片段和载体,其次需要用DNA连接酶将目的基因与载体连接;RNA聚合酶催化转录过程,获得重组质粒时不需要RNA聚合酶;获得重组质粒时,需要具有标记基因的质粒作为载体;重组质粒是由目的基因与质粒形成的;四种脱氧核苷酸是合成DNA的原料,获得重组质粒不需要四种脱氧核苷酸。]5.在基因表达载体的构建中,下列说法不正确的是()A.基因表达载体的构建方法不完全相同B.有了启动子才能驱动基因转录出mRNAC.终止子的作用是终止翻译过程D.基因表达载体的结构包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.com小学、初中、高中各种试卷真题知识归纳文案合同PPT等免费下载www.doc985.comC[因为受体细胞有植物、动物、微生物之分,且目的基因导入受体细胞的方法不同,因此,基因表达载体的构建方法是不完全相同的,A正确;启动子是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需要的蛋白质,B正确;终止子的作用...